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ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)標(biāo)本怎樣收集保存!
更新時間:2019-05-27   點(diǎn)擊次數(shù):1377次

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液體類標(biāo)本
標(biāo)本有必要為液體,不含堆積。包含血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、安排勻漿等。1ml的全血可得到0.5ml的血清或血漿。每個標(biāo)本量搜集體積=100ul×檢測種類。取材前須向出售人員索要說明書。
血清:
室溫血液天然凝結(jié)10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。搜集上清。如有堆積構(gòu)成,應(yīng)再次離心。
血漿:
應(yīng)根據(jù)試劑盒的要求挑選EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,參加10%(v/v)抗凝劑(0.1M檸檬酸鈉或1% heparin 或2.0%EDTA.Na2)混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。細(xì)心搜集上清。如有堆積構(gòu)成,應(yīng)再次離心。
尿液、胸腹水、腦脊液:
用無菌管搜集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。細(xì)心搜集上清。如有堆積構(gòu)成,應(yīng)再次離心。
細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管搜集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。細(xì)心搜集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度抵達(dá)100萬/ml左右。經(jīng)過重復(fù)凍融,以使細(xì)胞損壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。細(xì)心搜集上清。保存過程中如有堆積構(gòu)成,應(yīng)再次離心。
安排標(biāo)本:
切開標(biāo)本后,稱取分量。參加一定量的PBS,緩沖液中可參加1μg/L蛋白酶抑制劑或50U/ml的Aprotinin(抑肽酶)。用手藝或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。細(xì)心搜集上清置于-20度或- 70度保存,如有必要,可以將樣品濃縮單調(diào)。分裝后一份待檢測,其他冷凍備用。

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